পিসিআর পণ্য পরিশোধনের উদ্দেশ্য কি?

2024 লেখক: Miles Stephen | [email protected]. সর্বশেষ পরিবর্তিত: 2023-12-15 23:34

শুদ্ধিকরণ ডিএনএ থেকে ক পিসিআর প্রতিক্রিয়া সাধারণত ডাউনস্ট্রিম ব্যবহারের জন্য প্রয়োজনীয়, এবং এনজাইম, নিউক্লিওটাইড, প্রাইমার এবং বাফার উপাদানগুলি অপসারণ করতে সহায়তা করে। ঐতিহ্যগতভাবে এটি জৈব নিষ্কাশন পদ্ধতি ব্যবহার করে সম্পন্ন করা হয়েছিল, যেমন ফেনল ক্লোরোফর্ম নিষ্কাশন, এর পরে ইথানল বৃষ্টিপাত।

এছাড়াও প্রশ্ন হল, কেন পিসিআর পণ্য বিশুদ্ধ করা প্রয়োজন?

তোমার দরকার পিসিআর পণ্য শুদ্ধ করুন অব্যবহৃত প্রাইমার, নিউক্লিওটাইড এবং এনজাইম থেকে পরিত্রাণ পেতে লাইগেশনের সাফল্য অপ্টিমাইজ করার জন্য, যা রক্ষণাবেক্ষণ এবং ক্রমানুসারে পণ্য এর পিসিআর . প্রতি শুদ্ধ করা দ্য পিসিআর পণ্য , আকার বর্জন ক্রোমাটোগ্রাফি ব্যবহার করা হয়.

অতিরিক্তভাবে, পিসিআরের পরে আমার কী করা উচিত? পুনরুদ্ধার সর্বাধিক করতে, 10 থেকে 20 μL TE বা জল দিয়ে রিটেনটেট কাপটি দুবার ধুয়ে ফেলুন। চূড়ান্ত পিসিআর প্রতিক্রিয়ায় এক মাইক্রোগ্রাম পর্যন্ত পরিবর্ধিত ডিএনএ থাকতে পারে যা বিভিন্ন আণবিক জীববিজ্ঞানের প্রয়োগের জন্য ব্যবহার করা যেতে পারে। এই অ্যাপ্লিকেশনগুলি এর অবশিষ্ট উপাদানগুলির জন্য কম বা বেশি সংবেদনশীল হতে পারে পিসিআর প্রতিক্রিয়া মিশ্রণ।

কেউ জিজ্ঞাসা করতে পারে, আপনি কীভাবে পিসিআর পণ্যগুলি পরিষ্কার করবেন?

ক্লাসিক্যাল পদ্ধতি ব্যবহার করা হয় পরিষ্কার আপ পিসিআর পণ্য সিকোয়েন্সিংয়ের আগে জেল ইলেক্ট্রোফোরেসিস, ইথানল বৃষ্টিপাত এবং কলাম ক্রোমাটোগ্রাফি অন্তর্ভুক্ত। বেশ কার্যকর হলেও, সমান্তরালভাবে একাধিক নমুনা প্রক্রিয়াকরণের সময় এই পদ্ধতিগুলি দ্রুত কষ্টকর হয়ে উঠতে পারে এবং নমুনা ক্ষতির বিভিন্ন ডিগ্রী প্রদর্শন করে।

কেন ডিএনএ পরিষ্কার করতে হবে?

আমরা পরিষ্কার আপ ডিএনএ জলীয় দ্রবণ থেকে বাফার সল্ট, এনজাইম বা অন্যান্য পদার্থ যা ডাউনস্ট্রিম অ্যাপ্লিকেশনগুলিকে প্রভাবিত করতে পারে অপসারণ করতে। উদাহরণগুলির মধ্যে রয়েছে পিসিআর প্রতিক্রিয়া পরিষ্কার উপরে, পরিষ্কার সীমাবদ্ধতা হজমের পরে এবং পরিষ্কার জিনোমিক বা প্লাজমিড পর্যন্ত ডিএনএ সেলুলার প্রোটিন / ধ্বংসাবশেষ দ্বারা দূষিত.